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忍冬叶绿原酸含量测定
【摘 要】目的：研究忍冬叶的化学成分,为忍冬叶药材标准的制定提供实验数据和科学依据.方法：采用高效液相色谱法测定了绿原酸的含量.结果：绿原酸含量不得少于0.83%.结论：为忍冬叶药材的准确鉴定和质量标准的制定提供了科学依据和资料,也为忍冬叶的开发应用研究奠定了基础.
【关键词】忍冬叶；质量标准；高效液相
1 实验方法
1.1 色谱条件
色谱柱：Damons i l C18 柱(250×4.6mm,5μm)； 流动相： 乙睛:0.4%磷酸（14:86）,临用前以0.45μm 微孔滤膜过滤并经超声脱气处理；检测波长：327nm；柱温：35℃；流速：0.8mL/min；进样量20μl.
1.2 对照品溶液的制备
精密称取绿原酸标准品4.33mg,置25mL 棕色容量瓶中,精密加入水,定容至刻度,摇匀,备用.
1.3 供试品溶液的制备
取药材粉末( 过四号筛)0.25g, 精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入水25ml,称定重量,水浴回流45min,放冷,再称定重量,用水补足减失的重量,摇匀,滤过.弃初滤液,精密吸取续滤液5ml 置25ml 棕色容量瓶中,加水至刻度,摇匀,再用0.45μm 微孔滤膜过滤,即得.
1.4 工作曲线的绘制
分别精密吸取绿原酸对照品溶液各0.5、1、1.5、2、2.5、3mL, 置10ml 的容量瓶中,加水定容至刻度,摇匀,用0.45μm 微孔滤膜过滤；按上述色谱条件进行测定,设定进样体积为20μL,记录色谱图.以峰面积为纵坐标,绿原酸进样量为横坐标进行线性回归,得回归方程Y等于29.99X+2.8893,r等于0.9999,（n等于6）.表明绿原酸在0.1732μg/ml ～ 1.0392μg/ml 范围内呈良好的线性关系,结果见表1、图1.
1.4.1 精密度考察
将4 号供试品溶液按上述色谱条件进行测定, 连续进样6 次, 每次进样量20μL, 测定峰面积, 结果见表,RSD等于1.62%（n等于6）,表明精密度良好.如表2 所示.
1.4.2 重现性考察
精密称取6 份同一样品(4 号),各约0.25g,按上述供试品溶液的制备方法平行制备6 份供试品溶液,再上述色谱条件测定,进样体积为20μL,得出绿原酸峰面积的RSD等于2.10%（n等于6）,表明重现性良好,结果见表3.
1.4.3 稳定性考察
精密称取4 号供试品溶液,按上述色谱条件测定,设定进样体积为20μL,每隔2h 进样1 次,共进6 次,测定峰面积, 结果见表,RSD等于2.82%（n等于6）,表明样品溶液在10h 内稳定.如表4 所示.
2 加样回收实验
取6 份干燥至恒重的已知含量的忍冬叶粉末（4 号）约0.25g,精密称定后,分别加入绿原酸对照品约2mg,按上述条件进行供试品溶液的制备；按上述色谱条件测定进行测定含量,按公式回收率等于（测得量- 样品中的含量）/（加入对照品的量）×100% 计算,结果表明平均回收率为98.48%,RSD等于2.65%（见表5）.
2.1 样品含量测定
按上述色谱条件进行测定,进样量为20μl,测定不同样品忍冬叶中绿原酸的百分含量.
2.2 数据统计与分析
将测得数据采用SAS 统计分析软件进行显著性分析.
3 结果与分析
本次实验选用了15 批忍冬叶样品,每个样品测得了6 个含量,不同样品忍冬叶中绿原酸的平均含量（以干燥品计算）以及经统计学处理的结果见表6.
研究结果显示,15 个样品中绿原酸含量为0.65 ～ 2.56%,样品间表现出较大的差异.10 号样品叶中绿原酸的含量最高,为2.51&plun;0.048%,并与其它样品存在显著性差异；样品6、2、14、1、5、9、3 中绿原酸含量为1.48 ～ 2.30%,属于含量较高的样品,已经达到了《中国药典》规定的金银花中绿原酸的含量,且与其它样品存在显著性差异；样品13、7、8、12、15、4 叶中绿原酸含量为0.83 ～ 1.38%,属含量较低的样品,并与其它样品比较具有显著性差异；样品11 号叶中绿原酸含量最低,仅为0.67+0.018%,亦与其他样品存在显著性差异.
忍冬叶绿原酸含量测定论文范文结:
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