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犬弓形虫病的临床症状、实验室诊断、类症鉴别与防治措施
摘 要：弓形虫病也叫做弓浆虫病、弓形体病,是由于感染刚地弓形虫而导致的一种人畜共患原虫病.犬感染该病后通常呈现隐性感染,只有机体免疫力降低时才会出现发病.病犬主要临床症状是高热稽留、食欲不振、呕吐、呼吸困难、眼鼻存在脓性分泌物、血性下痢以及体表淋巴结肿大等,最终由于败血症死亡.关键词：犬；弓形虫病；病原生活史；发病机理；临床症状；实验室检查；类症鉴别；药物治疗1 病原生活史
自然界中广泛分布弓形虫,中间宿主为多种动物和人,终末宿主是猫科动物,即整个生活史都在中间宿主和终末宿主体内完成.弓形虫的发育可分成五个阶段,即滋养体、包囊、裂殖体、配子体和卵囊,其中前两个阶段是在中间宿主内进行,而后三个阶段只在终末宿主也就是猫科动物的肠道和体表上.虫体发育过程是猫科动物食入发育成熟的卵囊或者包含弓形虫包囊的动物组织,卵囊内的子孢子或者包囊内的滋养体就会侵入机体消化道,且逐渐移动到肠上皮细胞,并在细胞内呈现球虫型的发育和繁殖.也就是先以裂殖方式生出大量裂殖子,在一段时间之后有些裂殖子会通过配子生殖发育为配子体以及大小配子,最终发育为卵囊.卵囊通过猫科动物的粪便排出体外,当外界环境适宜时,2～4天之后就会发育成感染性卵囊.另外,猫科动物摄入的滋养体中有些会进入血液和淋巴循环,从而运送到机体各个脏器和组织,并侵入有核细胞,之后在有核细胞内以二分法或者内出芽法进行繁殖.在这个繁殖过程中,猫科动物会自然形成免疫力及抵抗力来抑制滋养体繁殖,有些滋养体会被消灭,另外一些滋养体会侵入机体脑和骨骼肌等,并在该处形成包囊.2 发病机理
犬感染弓形体病通常是由于吞食含有滋养体及包囊的肉、内脏或者食入孢子化的卵囊等,还能够通过损伤的皮肤、眼、呼吸道以及胎盘等途径发生感染.另外,该病的发生还与犬具有的食粪恶习或者捕食鼠类等相关.当犬食入猫排出的卵囊后,里面的子孢子会通过淋巴液和血液循环侵入肠道组织以外的细胞中,并进行双芽方式繁殖,生成很多速殖子,此时为急性感染期.当机体产生免疫力时,速殖子会变成缓殖子,并形成包囊,且会长时间生存在脑、眼、骨骼肌以及心中,此时为慢性感染期.如果犬没有形成免疫力和抵抗力,加之弓形虫具有很强毒性,就可能导致机体出现急性发病.反之,如果弓形虫繁殖受到阻碍,就会出现轻微发病或者没有表现出任何临床症状,且一些脏器组织中存留的虫体会逐渐形成包囊.该病通常是小于1岁的幼犬或者青年犬发生,妊娠母犬也能够感染该病,并会发生流产或者早产,而成年犬通常呈隐性感染,但有些也会发生死亡.3 临床症状
幼龄犬通常呈急性型,主要表现出精神极度萎靡,食欲不振.体温通常升高达到41～42℃,呈稽留热,眼鼻流出脓性分泌物,可视黏膜苍白,体表淋巴结发生肿大,经常咳嗽,呼吸浅且快,往往呈腹式呼吸.发病初期出现便秘,2～3天之后开始发生下痢,症状严重时会发生血性腹泻.病程后期,病犬会出现运动失调、麻痹等症状.发病7～10天后,部分病犬的视网膜或者耳翼、颈、腹下、背等部位皮肤出现紫红色斑区或者存在出血点,部分体温开始降低,且伴发死亡.妊娠母犬患病后会发生流产或者早产.慢性型病犬,由于弓形虫会长时间存在于肌肉、眼球、脑内,会使其出现运动障碍,以及视力障碍、斜视、癫痫样痉挛和后躯麻痹等症状.大部分成年犬呈隐性感染,不会表现出明显的症状,但能够向体外排出弓形虫包囊.4 实验室诊断4.1 病原体检查4.1.1细菌培养
在无菌条件下,取病死犬肝脏、脾脏、肺脏等内脏组织,分别在营养琼脂平板或者血琼脂平板上汇总,放在37℃恒温培养箱内进行24～48 h培养,没有长出细菌.4.1.2显微镜检查
取病犬腹水和前肢静脉血分别进行涂片,接着使用甲醇进行2～3 min固定,再经过姬姆萨染色,最后放在油镜下观察.如果在红细胞内看到有少量呈弓形或者香蕉形的滋养体,一端钝圆、一端略尖,胞浆被染成浅蓝色,核被染成紫红色,就能够确诊感染弓形虫病.4.1.3动物接种
取病犬腹水或者取病死犬的内脏组织,添加适量青链霉素生理盐水进行稀释处理,接着给小白鼠腹腔注射,经过1～2周观察小白鼠是否出现发病.如果发病则要取其腹水或者腹腔洗涤液进行涂片、染色、镜检.4.1.4虫体集中检查
取2g左右以上病料,放在无菌组织捣研机内,充分研碎后加10～20 mL灭菌生理盐水,混合均匀后以500 r／min的速度进行3 min离心,接着使用灭菌纱布过滤,以除去沉渣.取滤液以1500 r／min的速度进行10 min离心,取沉渣进行涂片,自然干燥后使用甲醛固定,在进行瑞氏液染色、显微镜观察,能够看到大量呈橘瓣状或者新月牙形的虫体.4.2 血清学检测
目前,有多种诊断该病的血清学方法,如染色试验、凝集试验、间接荧光抗体试验、免疫胶体金技术、酶联免疫吸附试验(ELISA)以及快速诊断试剂条或者试剂盒等.在临床上,普遍采取快速诊断试剂、酶联免疫吸附试验( ELISA)以及间接血凝试验(IHA)等.其中IHA方法简单,便于操作,结果快速,无需使用特殊的设备,也是诊断该病的主要方法.一般来说,血清滴度为1: 32时认为可疑,达到1: 64以上时为阳性,达到1: 32以下时为阴性.ELISA方法是指通过酶的高催化效率,促使反应效果被放大,增强检测敏感性以及灵敏度,具有较好的特异性和敏感性,检测结果客观,容易定量.另外,目前市面上还具有多种快速检测试纸条和试剂盒能够用于检测犬弓形虫的抗体或者抗原,如犬弓形虫抗体(TOXOAb)/(TOXOAg)抗原快速检测卡．是以胶体金免疫层析技术为基础,抗体检测需要使用血清作为样本,抗原检测需要使用血清或者表现出明显腹泻排出的粪便作为样本,是目前快速检测该病的一种方法.5 类症鉴别5.1 与犬瘟热鉴别
在临床症状上,犬弓形虫病容易与犬瘟热尤其是神经型犬瘟热混淆,且都是小于1岁的犬容易发生.患有弓形虫病的病犬主要表现出稽留热,体温升高,一般达到40～42℃,而犬瘟热早期会出现典型的双相热,也就是初期能够达到大约40℃,经过1～2天即可降低到正常水平,再经过2～3天又会开始升高.犬弓形虫病的典型症状是肺炎、肌肉麻痹和弓形虫性肌炎,且病程后期往往会导致局部组织（如腹部及背部皮肤）发生出血,形成坏死灶；犬瘟热的主要症状是呼吸道症状（流出脓性鼻液,且在鼻尖形成结痂）和神经炎症反应（肌肉震颤）,但不会导致皮肤发生出血、坏死.使用犬瘟热病毒抗原快速检测试纸,如果结果为阴性即基本能够排除发生犬瘟热；如果血涂片中存在滋养体,且中性粒细胞数量增加,白细胞数量减少,再结合使用犬弓形虫抗原快速检测试纸,如果检测结果为阳性,即可确诊发生弓形虫病.如果血检发现白细胞数量明显减少,且具有犬瘟热症状,就可能混合感染犬弓形虫病和犬瘟热.5.2 与犬传染性肝炎鉴别
犬弓形虫病由于表现出高热稽留、腹泻、贫血等症状,容易被误诊发生犬病毒性肝炎.但犬传染性肝炎主要症状是角膜混浊和胃肠炎,在出现高热稽留的过程中会呈现渴欲明显增强,且发生黄疸,血液不容易凝固,剖检发现体腔存在血样渗出液,且肝脏、胆囊发生病变,这是与犬弓形虫病区别之处.6 防治措施6.1 药物治疗
药物肌肉注射,病情可按体重使用50 mg/kg磺胺 6甲氧嘧啶或者10 mg甲氧苄嘧啶,注意首次用量加倍,每天2次,连续使用7天.止吐止血,病犬可按体重肌肉注射15 mg/kg止血芳酸、o．5 mL/kg爱茂尔.补液,病犬可按体重静脉注射50～60 mL/kg5%葡萄糖盐水,并配合添加适量的维生素B6、维生素C、雷尼替丁、地塞米松以及10%葡萄糖酸钙,还要辅以维生素B1.、肌苷和肝泰乐,能够促使肝功能恢复以及生成和释放红细胞.如果病犬自身酸碱平衡被破坏,可按体重静脉注射2～3 mL/kg 0.1%～0.3%碳酸氢钠（用5%葡萄糖稀释5%碳酸氢钠）.也可按体重使用2～3 mL/kg清开灵注射液,添加适量5%葡萄糖稀释后进行静脉注射.连续输液3天后,病犬精神状态明显好转,之后再进行2天的巩固治疗,一般在1周后即可痊愈.6.2输血疗法
病犬采取简易的“三滴法”配血试验,即取1滴供血犬血液,1滴病犬血液以及1滴抗凝剂滴加在同一片载玻片上,完全混合后肉眼观察是否发生凝集,如果没有采能够进行输血.病犬按体重输入10 mL/kg健康犬全血,且在整个输血过程中要注意观察其反应.如果出现不安、心悸亢进、呕吐、呼吸急促、痉挛等症状,要立即停止输血,并使用强心药、抗过敏药等.一般治疗第二天,病犬精神状态就明显好转.6.3 加强饲养管理
犬舍加强日常管理,要及时进行清扫,确保舍内干燥、清洁.不允许猫进入犬舍,避免所用饲料以及饮水被猫粪污染.犬舍要加强防鼠灭鼠,避免其食入鼠或者其他动物尸体.犬不允许饲喂生肉,防止其食入患病和带虫动物体内的包囊体和滋养而发生感染.犬舍定期进行消毒,常选择使用20%石灰水、3%烧碱、1%来苏儿等.
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