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产超超广谱B一内酰胺酶革兰阴性菌的表型检测
摘 要：目的：检测湛江中心人民医院产超超广谱β-内酰胺酶革兰阴性菌的表型,从而了解耐药机制,有利于理解耐药特性与指导临床用药.方法：收集革兰阴性菌218 株（包括大肠埃希菌108 株,克雷伯菌属73 株,阴沟肠杆菌37 株）,用双纸片确诊法检测ESBLs；三维试验检测产AmpC 酶；标准纸片扩散法检测耐药性.结果：湛江中心人民医院革兰阴性菌中ESBLs检出率36.7%,AmpC 为6.88%,SSBL 为2.29%.体外抗生素敏感试验显示,产ESBLs 和质粒介导AmpC 酶菌株全部表现为多重耐药,所有菌株对亚胺培南均敏感.结论：产SSBL 革兰阴性菌是重要的医院内感染细菌,主要的耐药机制是产ESBLs 和AmpC酶,用碳青霉烯类药物治疗效果最好.
关键词：超超广谱β-内酰胺酶；革兰阴性菌；表型
近几年,随着抗菌药物在临床应用的增多,而且不规范使用,导致细菌耐药性日益严重,甚至造成多重耐药.对革兰阴性菌的耐药机制研究,特别对产超超广谱
β-内酰胺酶革兰阴性菌的表型检测,可以很好指导临床用药.现今国际上把同时产ESBLs和质粒介导AmpC酶称为超超广谱β-内酰胺酶（简称SSBL）.产ESBLs和质粒介导AmpC酶菌株常为多重耐药株,给临床治疗带来极大困难.务必重视对产ESBLs和质粒介导AmpC酶特别是产SSBL菌株的临床检测,防止并控制耐药的发生和发展.本文对湛江中心人民医院2016年1月到2016年12月期间产SSBL革兰阴性菌的表型进行了研究.
1 村料与方法
1．1 材料
1.1.1 临床菌株 收集2016 年1 月到2016 年12 月,从湛江中心人民医院住院患者送检的各种标本培养分离出的革兰阴性菌218 株（大肠杆菌108 株,肺炎克雷伯菌73 株,阴沟肠肝菌37 株）,菌株收集无重复.
1.1.2 仪器及主要试剂 VITEK- 2compact 全自动微生物鉴定仪；VITEK 比浊仪；无菌超净工作台；血平板；MH 平板.
1.2 方法
1.2.1 表型测定 双纸片确诊法测ESBLs,双纸片协同试验法测ESBLs,三维试验检测产AmpC 酶[1].
1.2.2 药物敏感性试验 采用K-B 纸片扩散法进行药物敏感性试验.
1.2.3 数据分析及统计学处理 全部药敏结果采用世界卫生组织（WHO）推荐的细菌耐药性监测软件WHONET5.3 进行统计处理.
2 结果
2.1 产ESBLs 菌株耐药表型
在分离出的218 株革兰阴性菌中,经表型确证试验证实80株为产ESBLs 菌株,其中大肠埃希菌38 株,肺炎克雷伯菌24株,阴沟肠杆菌18 株.ESBLs 总体检出率为36.7%（80/218）,其中大肠埃希菌检出率为35.2%（38/108）,肺炎克雷伯菌检出率为32.9%（24/73）,阴沟肠肝菌检出率为48.6%（18/37）.本研究中产ESBLs 菌株全部表现为多重耐药,不但对大部分β-内酰胺类抗生素高度耐药,对氨基糖苷类、喹诺酮类、复方新诺明和氯霉素等非β-内酰胺类抗菌药物的耐药率也明显高于非产ESBLs 菌株.仅对亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、头孢吡肟、头孢他啶、哌拉西林/他唑巴坦的耐药率尚低于50%.
2.2 产AmpC 菌株耐药表型
在分离出的218 株革兰阴性菌中,经三维试验证实15 株为产AmpC 菌株,其中大肠埃希菌6 株,克雷伯菌属5 株,阴沟肠杆菌4 株.AmpC 总体检出率为6.88%（15/218）,其中大肠埃希菌检出率为5.56%（6/108）,肺炎克雷伯菌检出率为6.85%（5/73）,阴沟肠肝菌检出率为10.81%（4/37）.本研究中产AmpC 菌株除对头孢吡肟,亚胺培南,复方新诺明,庆大霉素及阿米卡星外,其他抗生素耐药率达100%.对头孢吡肟和复方新诺明的耐药率为85.7%；对庆大霉素和阿米卡星的耐药率为71.4%；对亚胺培南高度敏感,未发现耐药菌株.
3 讨论
AmpC 酶和ESBLs 目前己成为介导革兰氏阴性杆菌对新型广谱β-内酰胺酶类抗生素耐药的两大类主要的β-内酰胺酶.ESBL 主要由质粒介导,而AmpC 酶最初被认为是由细菌染色体介导,即由位于染色体上的AmpR,ampD,ampE 以及ampG 基因调控,ampC 基因转录合成.但在近年来这些基因在质粒上相继被发现,常在大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、奇异变形杆菌中持续高水平表达.SSBL 由于同时具有AmpC 酶和ESBLs 的耐药特性,其耐药谱更广,治疗更棘手,危害更大.
药敏试验结果显示产ESBL菌株全部为多重耐药株,除对亚胺培南外其他抗生素的耐药率达100%.临床上,对于产ESBLs细菌感染患者可根据临床情况和药敏试验结果选用头霉素类、β-内酰胺/β-内酰胺酶抑制剂复合物类或碳青霉烯类抗生素进行治疗.AmpC酶的检出率尽管明显低于ESBLs,但由于该酶具有广泛而强大的水解能力,其优先作用底物是头孢菌素类抗生素,对β-内酰胺酶抑制剂不敏感,对三代头孢菌素和头霉素耐药,但对碳青霉烯类和四代头孢菌素敏感,这样的细菌如果在医院内传播,将给临床治疗和院内感染控制造成极大困难.
产SSBL 菌株的出现,标志着对β-内酰胺类抗生素的耐药进入一个新的严峻时代.由于SSBL 同时产ESBLs 和AmpC 酶,临床上对于产SSBL 细菌感染患者不论体外药敏结果是否敏感,均应避免使用青霉素类、头霉素类、三代头孢菌素和氨曲南,宜首选碳青霉烯类【2】.
本研究表明,多重耐药现象、多种耐药机制普遍存在于革兰阴性菌,给临床治疗带来了困难.我们应提高临床对SSBLs细菌的检测和研究水平,进一步进行临床分离出的菌株类型和分布进行研究,认真分析临床感染危险因素,综合判断患者的预后情况,通过合理用药而达到疗效,同时延缓昂贵广谱抗生素的应用,减轻患者经济负担等,做到最大限度的节省人力、物力而达到最有效的治疗.
参考文献：
[1] 汪雅萍,应春妹,张灏.革兰阴性杆菌AmpC 酶的检测与分析[J].检验医学,2004,19（5）：390-392.
[2] 文细毛,任南,徐秀华,等. 全国医院感染监控网医院感染病原菌分布及耐药性分[J]. 中华医院感染学杂志,2002,12（4）：241-244.
检测论文范文结:
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