这是一篇与肺炎论文范文相关的免费优秀学术论文范文资料,为你的论文写作提供参考。
猪血清对猪肺炎支原体培养影响
郑铁鑫 张影 柴华 尹尧 付丽杰/ 哈药集团生物疫苗有限公司
一、材料
(一)菌株
1. 猪肺炎支原体P-5722-3 株,由美国硕腾动物保健公司提供,哈药集团生物疫苗有限公司保藏.
2. 猪肺炎支原体P-5722-3 株CCU 阳性标准品(CCU 检测),由美国硕腾动物保健公司提供,哈药集团生物疫苗有限公司保藏.
(二)完全培养基
1. 培养基组分A :根据猪肺炎支原体P-5722-3 株培养基配方要求,制备组分A.
2. 培养基组分B :猪血清
3. 猪肺炎支原体P-5722-3 株完全培养基由培养基组分A 与培养基组分B 共同制备,培养基组分A 由哈药集团生物疫苗有限公司采用无菌过滤方式制备,培养基组分B 采用热灭活方式制备.
(三)无菌检验培养基
酪胨琼脂斜面(G.A)、硫乙醇酸盐酪胨汤(T.G) 葡萄糖蛋白胨(G.P),均由本公司培养基班组提供.
(四)设备
恒温振荡器: 上海世平实验设备有限公司SPH-211C
PH 计: METTER TOLEDO FE 20C
二、方法
(一)试验方法
针对培养组分B,分别选择5 种猪血清,进口猪血清1#( 美国产)、进口猪血清2#(新西兰产)、国产猪血清3#、国产猪血清4#、国产猪血清5#,各2 个批次,按培养基总量10% 与培养基组分A 制备成猪肺炎支原体完全培养基,进行平行培养试验,猪血清在使用前均采用56℃,30 min 热灭活处理.
(二)培养方法
取猪肺炎支原体P-5722-3 株菌株按10% 接种完全培养基中,37℃振荡培养,每隔8 h 检测一次PH 值,当PH 值接近6.8 时,将检测时间缩短,直至PH 值到达6.8左右时,取少量样品进行检测并传代培养,连续传代培养三代并分别进行无菌检验.
(三)菌液浓度测定方法
采用CCU 法(颜色变化单位测定法),该方法是以微生物在培养基中的代谢活力为指标,来计算微生物的相对含量,取51 支无菌培养管,每一管装1.8 ml 猪肺炎支原体完全培养基( 含有酚红) ;在第一管加入0.2 ml待测猪肺炎支原体菌液,充分混匀,从中吸取0.2 ml 加入到第二管,以此类推,10 倍梯度稀释,直到最后一管,做好标记,进行五组;采用同样的方法对CCU 阳性标准品进行稀释,最为阳性对照,取未接种的一管作为阴性对照,置于37℃振荡培养14 ~ 16 d,根据颜色变化情况计算CCU 含量.
三、结果
1. 进行3 次5 组平行试验,试验结果见表1、表2、表3.
(备注:猪肺炎支原体P-5722-3 株CCU 阳性标准品检测区间值在0.2×108 ccu50/ml ~ 1×108 ccu50/ml)2. 五种猪血清摇瓶试验结果.
1. 三组平行试验数据无较大性偏差,数据可信,可作为参考性依据.
2. 通过分别选择2 各批次血清进行对照试验,降低批次间血清差异影响因素.
3. 通过表1、表2、表3 可以看出,猪肺炎支原体P-5722-3 株使用进口1# 猪血清制备的完全培养基培养效果最好.
四、小结与讨论
1. 美国产进口1# 猪血清与新西兰产进口2# 猪血清批间差异较小,在培养上表现均较好,尤其是美国产进口1# 猪血清最为突出.
2. 国产4# 猪血清较国产3# 猪血清与国产5# 猪血清要好,但其批间差异较大.
3. 猪肺炎支原体P-5722-3 株菌株不管在进口血清还是在国产血清中,连续三代培养呈现培养结果(CCU)上升趋势.
4. 通过三组平行试验,验证了猪血清作为培养组分B 在培养过程中的重要性,选择出最为适合猪肺炎支原体P-5722-3 株菌株生长的猪血清.
肺炎论文范文结:
适合不知如何写肺炎方面的相关专业大学硕士和本科毕业论文以及关于肺炎论文开题报告范文和相关职称论文写作参考文献资料下载。